Saghatelyan, A. R. (2020) Optimization of PCR conditions by recombinant DNA polymerase I originating from Thermus scotoductus K1 strain. Հայաստանի կենսաբանական հանդես, 72 (1-2). pp. 72-77. ISSN 0366-5119
![]()
| PDF - Requires a PDF viewer such as GSview, Xpdf or Adobe Acrobat Reader 646Kb |
Abstract
The optimization of PCR reaction components and cycling conditions for novel recombinant TsK1 polymerase originating from Thermus scotoductus K1 strain has been performed. It was shown that Mg2+ in final concentration of 3 mM was suitable for efficient PCR using TsK1, and higher concentrations inhibited the reaction. Addition of glycerol as enhancer was essential for PCR. Enzyme exhibited amplification activity in both mono- and multiplex PCR, and might become a promising tool for different molecular biological applications as well as in diagnostics. Իրականացվել է ռեկոմբինանտ TsK1 պոլիմերազի կիրառմամբ ՊՇՌ ամպլիֆիկացման պայմանների բարելավում։ Ցույց է տրվել, որ արդյունավետ ամպլիֆիկացիայի իրականացման համար բավարար է Mg2+ իոնների 3 մՄ կոնցենտրացիան, ընդ որում, ավելի բարձր կոնցենտրացիաները ճնշում են ՊՇՌ-ն։ Ռեակցիայի իրականացման համար պարտադիր է գլիցերոլի ավելացումը որպես կայունացուցիչ։ Ֆերմենտը ցուցաբերում է արդյունավետ ամպլիֆիկացիայի հնարավորություն ինչպես միակի, այնպես էլ՝ մուլտիպլեքս ՊՇՌ ռեակցիաներում և կարող է խոստումնալից գործիք հանդիանալ տարաբնույթ մոլեկուլային գենետիկական կիրառություններում ինչպես հետազոտական, այնպես էլ՝ ախտորոշման ոլորտներում։ Была проведена оптимизация компонентов ПЦР реакции и условий амплификации с применением новой рекомбинантной полимеразы TsK1, происходящей от штамма Thermus scotoductus K1. Эффективный ПЦР осушествляется при наличии Mg2+ в конечной концентрации 3 мМ, а высокие концентрации подавляют реакцию. Также добавление глицерола в качестве усилителя крайне необходимо для ПЦР. Фермент проявляет высокую эффективность амплификации как в моно-, так и в мультиплексной ПЦР и может стать многообещающим инструментом для различных молекулярно-биологических применений в рутинных исследованиях, а также в диагностике.
Item Type: | Article |
---|---|
Additional Information: | Thermus scotoductus K1 շտամի ԴՆԹ-պոլիմերազ I-ի կիրառմամբ ՊՇՌ ամպլիֆիկացման պայմանների բարելավումը; Оптимизация условий ПЦР амплификации с применением новой рекомбинантной ДНК-полимеразы, происходящей от штамма Thermus scotoductus K1 |
Uncontrolled Keywords: | Սաղաթելյան Ա. Ռ., Сагателян А. Р., DNA-polymerase, polymerase chain reaction, Thermus |
Subjects: | Biology > Biochemistry |
ID Code: | 11667 |
Deposited By: | Ruzan Tumanyan |
Deposited On: | 09 Aug 2020 14:54 |
Last Modified: | 09 Aug 2020 14:54 |
Repository Staff Only: item control page